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细胞染色

细胞染色
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编辑时间 : 2019-06-04

概述:

   DAPI ,dihydrochloride, 即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处,一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。结合到双链DNA上DAPI分子的荧光强度提高大约20倍,常用与荧光显微镜观测,根据荧光的强度可以确定DNA的量。另外,因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。在荧光显微镜观察下,DAPI染剂是利用紫外光波长的光线激发。单独DAPI的最大吸收波长为340nm,最大发射波长为488nm;当DAPI与双链DNA结合时,最大吸收波长为364nm,最大发射波长为454nm。

操作方法:

1. 细胞核染色

  a. 将细胞接种至培养皿/孔板/玻片上,待细胞生长贴壁;

  b. 吸去细胞上的细胞培养基,PBS清洗三次;

  c. 加入适量的3.7%甲醛固定细胞10 min;

  d. 吸去固定剂,用PBS冲洗三次,每次5 min;

  d. 取适量的DAPI染色液(覆盖即可)加入细胞中,室温条件下染色3~5 min;

  e. 吸去多余的染色液,用PBS清洗三次;

  f. 显微镜下观察细胞染色结果;

包装规格:

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储存条件

4℃保存,1年有效; 

仅供科学研究使用


注意事项: 

1. DAPI孵育时,须在避光条件下操作。

2. DAPI有致癌性,用的时候小心,有条件最好带那种透明的簿膜手套。